ITS 補充劑是一種重要的細胞培養(yǎng)基添加劑,主要成分包括重組胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白和亞硒**等。以下是其在細胞培養(yǎng)中起到的關鍵作用:
1.促進細胞增殖
加速營養(yǎng)物質(zhì)攝?。阂葝u素能夠促進細胞對葡萄糖和氨基酸的吸收,為細胞提供能量與合成原料,進而支持蛋白質(zhì)及核酸的生物合成,推動細胞生長分裂。
增強代謝活性:通過調(diào)控磷酸鹽運輸?shù)冗^程優(yōu)化細胞內(nèi)的代謝路徑,提升整體代謝效率,使細胞更高效地利用培養(yǎng)環(huán)境中的資源。
實驗驗證效果顯*:例如在低血清條件下(如含2%胎牛血清的培養(yǎng)體系),添加ITS后AML12細胞數(shù)量大幅增加,存活率也明顯提高。
替代部分血清功能:傳統(tǒng)方法需加入較高濃度的胎牛血清以維持細胞生長,但ITS可通過模擬血清中的活性成分,將所需血清量從常規(guī)的10%降至2%-4%,減少動物源性成分的使用并降低成本。
適用于多種培養(yǎng)系統(tǒng):無論是基礎型還是復雜型培養(yǎng)基(如MEM、RPMI-1640或DMEM/F-12),均能有效發(fā)揮作用,兼容性強且操作便捷。
3.抗氧化與毒性防護
清除自由基損害:轉(zhuǎn)鐵蛋白作為鐵離子載體,可結(jié)合游離鐵防止其參與芬頓反應生成有害的氧自由基;同時亞硒**作為谷胱甘肽過氧化物酶的輔助因子,直接中和過氧化氫等活性氧物質(zhì),雙重機制保護細胞免受氧化應激損傷。
維持氧化還原平衡:這種協(xié)同作用有助于穩(wěn)定細胞內(nèi)外環(huán)境的氧化還原狀態(tài),保障長期培養(yǎng)時的細胞健康。
4.ITS 補充劑支持定向分化
誘導特定譜系發(fā)育:在間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞分化的過程中,ITS能促進硫酸軟骨素和膠質(zhì)蛋白的表達,通過阿利新藍染色可觀察到典型的成軟骨特征,顯示出對細胞命運決定的調(diào)控能力。
適用于組織工程研究:此類特性使其成為再生醫(yī)學領域制備功能性組織的有力工具。
5.提供必需微量元素
精準補充鐵元素:轉(zhuǎn)鐵蛋白以可控方式釋放微量鐵離子,避免過量導致的毒性積累,同時滿足細胞色素酶系等功能蛋白的合成需求。
動態(tài)調(diào)節(jié)礦物質(zhì)水平:與其他成分共同作用實現(xiàn)微量元素穩(wěn)態(tài),確保細胞周期正常運轉(zhuǎn)。
6.ITS 補充劑優(yōu)化培養(yǎng)體系穩(wěn)定性
濃縮配方靈活適配:通常以100倍濃縮液形式供應,可根據(jù)實驗需求調(diào)整終濃度,既保證活性又便于標準化管理。
即用型解決方案:水溶性質(zhì)地易于均勻分散于培養(yǎng)基中,減少沉淀風險,提高重復實驗的一致性。
