使用RND試劑盒進行實驗前的準備工作:
1.閱讀說明書
仔細閱讀試劑盒的說明書,了解檢測原理、適用范圍、樣本類型、操作步驟及注意事項。
確認試劑盒的有效期和儲存條件(如是否需要避光、冷藏或凍存)。
2.樣本準備
樣本類型:根據(jù)試劑盒要求收集樣本(如血液、血清、血漿、細胞裂解液、環(huán)境水樣等)。
樣本處理:
血清/血漿:需離心分離,避免溶血。
細胞或組織樣本:需勻漿或裂解后提取目標物質(zhì)(如蛋白、DNA、RNA)。
環(huán)境樣本:可能需要過濾、離心或稀釋以去除雜質(zhì)。
樣本保存:暫不用的樣本需按說明書要求儲存(如-20℃凍存或4℃短期保存)。
3.試劑平衡
將所有試劑恢復至室溫(通常需放置15-30分鐘),避免溫差導致反應異常。
檢查試劑是否變質(zhì)(如變色、沉淀或渾濁)。
4.器材準備
移液器、Tip頭、離心管、酶標板(如需)、溫育箱、搖床、計時器等。
確保器材無污染,建議使用一次性耗材或經(jīng)過滅菌處理的器材。
RND試劑盒的關鍵注意事項:
1.精準加樣
使用校準過的移液器,確保加樣量準確。
避免氣泡產(chǎn)生,加樣時Tip頭緊貼孔壁,避免交叉污染。
2.時間控制
嚴格遵循孵育、洗滌和反應時間,誤差可能影響結果。
建議使用計時器,并記錄每一步的實際時間。
3.避免干擾
樣本中若含干擾物質(zhì)(如高濃度鹽離子、溶血或脂血),需通過稀釋或預處理去除。
避免反復凍融樣本,可能導致目標物質(zhì)降解。
4.對照設置
陽性對照:用于驗證試劑活性(如已知濃度的標準品)。
陰性對照:排除非特異性反應(如空白孔或無關樣本)。
5.數(shù)據(jù)處理
繪制標準曲線:以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,擬合線性回歸。
計算樣本濃度:通過標準曲線插值法計算樣本中靶標的濃度。
